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啤酒酵母的保存方法之液氮保藏法

文章出处:啤酒酵母作者:啤酒酵母发表时间:2013-5-25 11:12:51

金汉森提供啤酒酵母的最后一种保存方法,那就是液氮保藏法
液氮保藏法是将保存的啤酒酵母菌种用保护剂制成菌悬液封于安瓿管内,经控制速度冻结后,贮藏在-150至-196℃的液态氮超低温冰箱中。
1.方法与步骤
(1)  安瓿管的制备:选用能经受温度的突然变化而不致于破裂、容易用火焰熔封管口、恢复培养时容易打开的安瓿管。安瓿管选好后,洗刷干净,贴好菌号,塞上棉塞,蒸汽灭菌后,烘干备用。
(2) 加保护剂:液氮保藏一般要添加保护剂。保护剂一般用脱脂乳、甘油蒸馏水溶液、二甲基矾蒸馏水溶液作保护剂。保护剂先加在安瓿管内后灭菌备用。
(3)  菌种培养:需保藏的菌种先在麦汁琼脂斜面培养基上培养2-3天,以得到健壮的菌体细胞,制成菌悬液,再将菌悬液加到容有保护剂并已灭菌的安瓿管内。
(4) 冷冻和保藏:将菌悬液加到安瓿管后,用火焰将安瓿管上部熔封,浸入水中检查有无漏洞,然后将已封口的安瓿管置冻结器内,在控制冻结速度为每分钟下降1℃的条件下,使样品冻结到-35℃。再用干冰和乙二醇冷冻至-78℃后,立即移到液态氮冰箱中保存,箱内温度为:气相中为-150℃,液相氮内-196℃。为防止安瓿管在取出时破裂,可将安瓿管置液氮冰箱内的气相中保藏。
(5)  恢复培养:保藏的菌种,如需用时,将安瓿管由冰箱取出,立即置38-40℃水浴中摇动,直到内部的结冰全部融化为止,以无菌操作开启安瓿管,将菌种移到麦汁培养基上培养。
2. 啤酒酵母保存的注意事项
(1) 若安瓿管熔封不严密或稍有破裂,在保藏期间液氮就会渗入安瓿管内,使用时,液氮就会从安瓿管内逸出,由于外面的温度高,液氮就会急速气化,膨胀而发生爆炸。因此安瓿管必须严格密封,同时在安瓿管恢复培养时也应该采取一些相应措施,如在水下融解,操作时操作人员应戴皮手套和面罩。
(2) 处理液氮时,应仔细操作。液氮与皮肤接触极易“冷烧”,应该小心操作。氮本身无色无臭,在较小的房间里操作应注意防止窒息,液氮容器应放置在通风良好的地方。
(3) 在保藏过程中,要做到取出安瓿管时不影响其它安瓿管的保藏。
 

以上就是啤酒酵母保存的方法,我公司是啤酒原料的专业公司,欢饮随时来咨询问题。

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